- 目前,防控非洲猪瘟已经成为猪场所有工作的重中之重,猪场一切工作都围绕着生物安全措施开展。随着非洲猪瘟检测的放开,很多猪场开展主动开展非洲猪瘟自检工作,及时发现非洲猪瘟早期感染,尽快确诊之一头感染猪只,在大面积污染之前精准清可以明显降低非洲猪瘟造成的经济损失。
- 猪场的非洲猪瘟早期筛查检测主要是使用实时荧光定量PCR,一般采集疑似病猪只的唾液、血液来检测抗原核酸,如果非洲猪瘟核酸阳性后立即采取精准清除"拔牙"处理,这是很多猪场检测非洲猪瘟的主要 *** 。
- 其实非洲猪瘟除了检测抗原核酸之外,还可以检测非洲猪瘟抗体,但很少有猪场进行检测非洲猪瘟抗体。认为非洲猪瘟基本上是急性感染发病病例,在抗体转阳前猪就已经发生死亡了,此时检测非洲猪瘟抗体是没有意义的,认为非洲猪瘟抗体检测存在一定滞后性。那么,非洲猪瘟的抗体检测真是就一无是处么?
检测非洲猪瘟的抗原or抗体?哪种检测对猪场更有意义?
- 众所周知,在我国流行非洲猪瘟主要是强毒株,它属于基因Ⅱ型,与俄罗斯、格鲁吉亚等国家流行毒株基因序列同源性在99.9%以上。非洲猪瘟强毒株对家猪的致死率是非常强的,一般在感染后在的几天就可以出现发热、厌食等临床症状,急性发病死亡率在90%以上。
- 由于在我国流行非洲猪瘟流行主要为强毒株,猪只感染非洲猪瘟后通常变现为急性发病,猪群有可能尚未产生有效抗体或者抗体滴度非常低时,病猪就已经发生死亡了。就是说病猪在感染的前7~12天没有产生有效的非洲抗体之前病猪就已经死亡,而用实时荧光定量PCR检测非洲猪瘟抗原核酸更为直接、更为准确,因此,非洲猪瘟急性发病一定要检测非洲猪瘟抗原,也就是病毒的核酸,这是非常有必要的。
- 目前,非洲猪瘟抗原核酸检测主要 *** 是采用实时荧光定量PCR(缩写为qPCR),实时荧光定量PCR是将PCR技术与光谱技术相结合一种检测技术,实时荧光定量PCR将对约朋友PCR可以有效避免电泳扩增产生气溶胶造成假阳性的污染,而且可以不仅能对检测结果定性,还能显示出具体数值,能够准确定量病毒含量。
- 该 *** 主要应用于非洲猪瘟疑似病例筛查和清除,一般采取疑似病例的全血、唾液、粪便、淋巴结、脾脏等。其中在唾液中出现病毒时间相对于血液早2-3天。因此,采集唾液、鼻拭子是可以更早地发现非洲猪瘟病猪,特别适用与非猪瘟早期清除和筛查。另外,一些复养的猪场、洗消中心等病毒含量较少环境样品也要非洲猪瘟实时荧光定量PCR的抗原核酸检测。
- 非洲猪瘟抗体检测中最常用的是ELISA *** ,ELISA也就是酶联免疫吸附试验,是一种常用的兽医抗体检测技术, 主要用于包括猪在内的多种动物疫病血清学调查。
- ELISA检测 *** 具有灵敏度高、特异性好、速度快、操作简单、成本较低、无需特殊仪器等特点, 特别适用于大批量样品的快速筛查。
- 非洲猪瘟ELISA抗体检测 *** 是通过标记物的某种酶检测血清中的非洲猪瘟抗体。当抗原和抗体结合时, 酶会引起底物发生颜色反应, 进而区分出非洲猪瘟抗体阳性血清。目前,国内外能够生产商品化的非洲猪瘟ELISA抗体检测试剂盒的公司不是很多。
- 如果通过非洲猪瘟抗体检测为非洲猪瘟病毒抗体阳性,这可以说明猪只现在或者之前感染过非洲猪瘟。国内外很多专家学者研究发现非洲猪瘟耐过康复的猪只是长期带毒的,会不定期向外界排出病毒,排毒时间至少是30-90天,甚至是数年。即使通过实时荧光定量PCR检测不到病毒核酸,但猪只也可能会出现病毒血症。
- 而且在耐过康复猪体内的一些组织器官可能会有非洲猪瘟病毒存在。如果受到外界应激 *** 就有可能出现病毒血症并向外界排出病毒,这些外界应激 *** 主要包括饲养密度过大,寒冷或炎热冷热应激、打针转群的机械性应激等。可见,非洲猪瘟耐过康复猪存在排毒的巨大风险。因此,非洲猪瘟慢性感染或者康复耐过猪检测非猪瘟抗体是非常有必要的。
- 另外,在不了解猪群背景信息的外场引种时候时,或者在本场挑选留种非洲猪瘟耐过康复的后备母猪时,不仅检测要非洲猪瘟抗原核酸,也要检测非洲猪瘟抗体。如果仅仅检测非洲猪瘟抗原核酸,没有检测非洲猪瘟抗体,非常容易将非洲猪瘟康复耐过猪漏检掉,这些漏检猪的风险是非常大。
- 随着非洲猪瘟在我国的持续流行,有可能将以点状散发的形式常态化,非洲猪瘟毒株毒力有可能逐渐变弱,强毒株有可能变为弱毒株,猪群有可能出现隐性带毒,隐性带毒有可能在血液中是检测不到非洲猪瘟的病原核酸,特别是一些隐性带毒的一些非洲野猪品种(疣猪、大林猪、非洲野猪)。另外,在我国流行的非洲猪瘟毒株是基因2型的格鲁吉亚毒株(Georgia 2007),但非洲猪瘟还有23个基因型和58种毒株在国外流行,这些毒力弱或者造成慢性感染的非洲猪瘟毒株会不会流入我国是未知数。因此,我国的非洲猪瘟检测抗体具有不可替代的意义。
- 总的来说,要确保猪场非洲猪瘟引种或者留种的万无一失。仅检测非洲猪瘟抗原核酸是远远不够的,容易漏检那些康复耐过猪,这是存巨大生物安全隐患和风险。因此,对于不了解猪群背景信息的外场引种时候时或者在本场挑选后备母猪留种时,是需要同时检测非洲猪瘟抗原和抗体,抗原、抗体双阴性才是最安全,也是最准确的检测方式。
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